期刊简介
本刊由解放军总医院-军医进修学院主办。1980年创刊，叶剑英元帅题写刊名。本刊以反映解放军总医院-军医进修学院及驻京部队医院医疗、教学、科研成果和军内外科技信息为目的，介绍医教研最新成果，培养高层次医学人才，促进军内外、国内外学术交流和医院的现代化建设。本刊是国家科技部《中国科技论文统计与分析》源期刊;《中文核心期刊要目总览》确认的综合性医药卫生类核心期刊;国内《中国生物学文摘》等检索刊物摘转的主要刊源。本刊属国家火炬计划项目----中国科学引文数据库来消耗期刊(K)R102;中国学术期刊综合评价数据库来源期刊(Z)R102;《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)》收录。《军医进修学院学报》以印刷版、光盘版和网络版三个版本公开发行
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首页>解放军医学院学报杂志
- 杂志名称：解放军医学院学报杂志
- 主管单位：解放军总医院-解放军医学院
- 主办单位：解放军总医院-解放军医学院
- 国际刊号：2095-5227
- 国内刊号：10-1117/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：获第二届全军优秀医学期刊奖期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 哥白尼索引(波兰)
胱抑素C原核表达载体的构建、表达及蛋白纯化
唐红卫；刘一凡；孙禅；端永艳；李迪；李绵洋；王成彬
关键词：胱抑素C, 基因表达, 大肠埃希菌, 镍柱亲和层析
摘要：目的：构建胱抑素C(cystatin C，Cys-C)原核表达载体并表达、纯化、鉴定目的蛋白。方法根据GeneBank报道的Cys-C基因序列，采用RT-PCR技术从人胚肾细胞系HEK293中获得Cys-C的cDNA序列，经PCR、酶切及测序确认终获得重组载体pET-30a(+)-CysC，转化大肠埃希菌Rosetta，通过异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalac-topyranoside，IPTG)诱导表达、经镍柱亲和层析法纯化获得Cys-C融合蛋白。结果序列分析表明，人Cys-C基因成熟肽编码区编码122个氨基酸；与GeneBank(NM-000099.2)中已报道的序列有100%的同源性。经IPTG诱导表达， SDS-PAGE电泳和ELISA分析显示，表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的20%，重组蛋白相对分子质量约为20000，经Ni2+-NTA agarose纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带并与商品化的人Cys-C单抗呈特异性反应。结论在大肠埃希菌中获得了Cys-C的表达，并经镍柱亲和层析得到较纯的胱抑素。
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