期刊简介

  本刊由解放军总医院-军医进修学院主办。1980年创刊,叶剑英元帅题写刊名。本刊以反映解放军总医院-军医进修学院及驻京部队医院医疗、教学、科研成果和军内外科技信息为目的,介绍医教研最新成果,培养高层次医学人才,促进军内外、国内外学术交流和医院的现代化建设。本刊是国家科技部《中国科技论文统计与分析》源期刊;《中文核心期刊要目总览》确认的综合性医药卫生类核心期刊;国内《中国生物学文摘》等检索刊物摘转的主要刊源。本刊属国家火炬计划项目----中国科学引文数据库来消耗期刊(K)R102;中国学术期刊综合评价数据库来源期刊(Z)R102;《中国期刊网》、《中国学术期刊(光盘版)》收录。《军医进修学院学报》以印刷版、光盘版和网络版三个版本公开发行


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  • 杂志名称:解放军医学院学报杂志
  • 主管单位:解放军总医院-解放军医学院
  • 主办单位:解放军总医院-解放军医学院
  • 国际刊号:2095-5227
  • 国内刊号:10-1117/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:获第二届全军优秀医学期刊奖期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 哥白尼索引(波兰)
解放军医学院学报杂志2017年第03期

尾侧型同源转录因子2慢病毒载体的构建及其转染骨髓间充质干细胞的实验研究

汪晓;孙涛

关键词:尾侧型同源转录因子2, 慢病毒属, 载体, 骨髓间充质干细胞, 溃疡性结肠炎, 大鼠
摘要:目的 构建携带尾侧型同源转录因子2(caudal-related homeobox transcription factor 2,CDX2)的大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),为大鼠溃疡性结肠炎模型的基因治疗提供工具.方法 根据GenBank信息,设计CDX2引物,采用PCR扩增CDX2基因片段;通过In-Fusion技术将目的基因片段连接到线性质粒载体中,然后转化感受态细胞,进行阳性克隆筛选及基因测序.将重组载体转染293T细胞,进行慢病毒包装、浓缩及滴度测定.体外分离并培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪(fluorescence activated cell sorting,FACS)检测细胞免疫表型.将携带CDX2基因的慢病毒载体转染至大鼠骨髓间充质干细胞,利用RT-PCR及Western blot等技术检测CDX2基因及蛋白的表达水平.结果 PCR、DNA测序及Western blot检测成功构建重组Ubi-CDX2-MCS-3FLAG-CMV-EGFP GV365慢病毒载体,测定滴度为2×108 TU/ml;成功完成大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养,FACS结果 显示,大鼠BMSCs表达CD29、CD73、CD90和CD105,而不表达CD34和CD45,符合骨髓间充质干细胞的表型.成功构建携带CDX2基因的BMSCs,RT-PCR及Western blot结果 显示CDX2基因转染至大鼠BMSCs并能稳定表达.结论 本研究成功构建了携带CDX2基因的大鼠BMSCs并稳定表达CDX2,为溃疡性结肠炎基因治疗的实验性研究提供了一种新的工具.